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産品詳情

可溶性OX40L(sOX40L)ELISA試劑盒

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産品名稱: 可溶性OX40L(sOX40L)ELISA試劑盒
産品型號:
産品展商: 其它品牌
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發布時間:2020-10-27

簡單介紹

可溶性OX40L(sOX40L)ELISA試劑盒


可溶性OX40L(sOX40L)ELISA試劑盒  的詳細介紹

本試劑盒僅供研究使用。
人可溶性OX40L(sOX40L)ELISA試劑盒使用目的:
本試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中待測物質的含量。
實驗原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线計算样品中待测物质浓度。
試劑盒組成

人硫氧还蛋白还原酶(TrxR)ELISA試劑盒標本要求
1.標本采集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反複凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
1.標准品的稀釋:本試劑盒提供原倍標准品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標准孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標准品准確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度爲5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩幹,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去,如此重複5次,拍幹。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鍾。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序總結:

計算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值計算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,計算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
人可溶性OX40L(sOX40L)ELISA試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用,酶標包被板開封後如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,並經常校對其准確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間*好控制在5分鍾內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.请每次测定的同时做标准曲线,*好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,計算时请*后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉汙染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數爲准。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書爲准。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6 个月

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